斑马鱼胚胎胚盾特异表达基因的鉴定

• 作者: 万传璐 曹羽 王强 闫一芳
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 斑马鱼 胚盾 流式细胞分选 RNA深度测序 原位杂交
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 441-447
• 页数: 7页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 4608字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2016.05.001

摘要

目的：由于原肠期细胞的剧烈运动，在斑马鱼胚胎的背侧汇聚形成了称为胚盾（ shield organizer）的结构，是胚胎发育的信号组织中心，在背腹轴建立和胚层诱导过程中具有关键作用。系统鉴定在胚盾特异表达的基因，可为进一步探讨胚盾形成的机制及其指导胚胎早期发育的分子机理提供参考。方法 Tg（ gsc：GFP）转基因鱼在胚盾表达特异的绿色荧光。通过流式细胞分选技术分离富集GFP阳性细胞并提取总RNA进行RNA深度测序，检测可能在胚盾高水平表达的基因。然后利用荧光实时定量PCR （ quantitative real-time PCR， qRT-PCR）和原位杂交技术鉴定若干在胚盾特异表达的基因。结果从Tg （ gsc：GFP ）转基因鱼胚胎中分离富集到了纯度超过96％的GFP阳性细胞，RNA深度测序的结果显示有657个基因的表达水平比整胚细胞或GFP阴性细胞高2倍以上。最后，确认了KIAA1324、ripply1、twist2、isthmin1、nme4、zgc174153、rrbp1b等7个基因在胚盾特异表达。结论系统鉴定到了斑马鱼胚胎胚盾特异表达基因，为下一步研究这些基因的发育生物学功能奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王强	中国科学院动物研究所膜生物学国家重点实验室	267	5471	42.0	69.0
2	曹羽	中国科学院动物研究所膜生物学国家重点实验室	3	8	1.0	2.0
3	万传璐	安徽大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
4	闫一芳	中国科学院动物研究所膜生物学国家重点实验室	4	2	1.0	1.0