人白介素-38原核表达载体的构建及其蛋白表达、纯化

• 作者: 周密 李明才 李燕 潘秀和 袁仙丽
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: IL-38 原核表达载体 重组蛋白 纯化
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 140-145
• 页数: 6页
• 分类号: R392.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2016.02.0026

摘要

[目的]构建人白介素(interleukin,IL)-38原核表达载体,原核表达IL-38重组蛋白、纯化及活性分析.[方法]PCR扩增IL-38成熟蛋白编码区,构建IL-38原核表达载体pET-44-hIL-38,转化BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导,表达IL-38重组蛋白,并利用其C末端的组氨酸标签进行镍离子亲和层析纯化,将纯化的重组IL-38作用于脂多糖(LPS)诱导的THP-1细胞,研究纯化IL-38蛋白的生物学活性.[结果]构建的IL-38原核表达载体测序结果与GenBank中基因序列一致;IPTG诱导产生的IL-38蛋白主要以可溶性形式存在,纯化的目的蛋白经SDS-PAGE凝胶电泳分析和Western Blot鉴定发现,蛋白纯度可达98％,细胞实验证明纯化的目的蛋白具有较高的生物学活性.[结论]成功构建了IL-38的原核表达载体,制备了具有生物活性的IL-38重组蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周密		30	112	7.0	8.0
2	李明才		30	137	5.0	11.0
3	李燕		28	53	5.0	7.0
4	袁仙丽		10	26	4.0	5.0
5	潘秀和		9	20	1.0	4.0