肝内胆管细胞癌相关成纤维细胞的分离、纯化及鉴定

• 作者: 杨柳晓 高强
• 来源期刊: 中国临床医学
• 学科: 医学
• 关键词: 肝内胆管细胞癌 肿瘤相关成纤维细胞 分离 鉴定
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 131-135
• 页数: 5页
• 分类号: R735.9
• 字数: 3960字
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨肝内胆管癌相关成纤维细胞(iCAFs)的分离、纯化和鉴定方法,为后续研究奠定基础.方法:在无菌条件下,留取肝内胆管细胞癌(iCCA)组织标本,充分剪碎后置入含Ⅳ型胶原酶和透明质酸酶的消化液中恒温振荡,将所得的单细胞悬液进行免疫磁珠分选纯化,分离出肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)并培养.通过观察细胞形态,并经免疫荧光和流式细胞仪测定,鉴定其是否为iCAFs.结果:iCAFs呈长条形或纺锤形,胞质透明,折光明显,胞核单个、呈圆形或卵圆形,细胞突起相互交错重叠形成网格状排列、密集时呈现“峰-谷”样表现;免疫荧光检测显示,α平滑肌肌动蛋白(+)、波形蛋白(+)、复合型角蛋白抗体(一);流式细胞仪检测示,α平滑肌肌动蛋白(+),同时CD34和CD45均为(一).结论:酶消化法联合免疫磁珠分选可有效分离出高纯度的iCAFs,为进一步研究iCAFs的相关功能研究提供了良好的平台.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高强	复旦大学附属中山医院肝外科	38	96	6.0	8.0
2	杨柳晓	复旦大学附属中山医院重症医学科	6	10	2.0	3.0