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miRNA-140过表达腺病毒载体的构建及鉴定
miRNA-140过表达腺病毒载体的构建及鉴定
作者:
段莉
贺鹏
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
miRNA-140
AdEasy系统
荧光定量PCR
骨肉瘤细胞
摘要:
目的:构建稳定表达成熟miRNA-140腺病毒表达载体.方法:从人类基因组中扩增出带有酶切位点的miRNA-140目的基因,将目的基因连接到穿梭质粒pDC316-mCMV-EGFP,进一步将带有目的基因的穿梭质粒重组到骨架质粒AdEasy,并将重组质粒转染到AAV-293细胞中包装成腺病毒载体,经过二次扩增之后获得高滴度的腺病毒,并且检测其包装效率及感染滴度.最后,用目的腺病毒感染骨肉瘤细胞,通过荧光定量PCR方法检测miRNA-140表达情况.结果:酶切鉴定和测序结果均表明,miRNA-140成功克隆入pDC316-mCMV-EGFP载体中.与AdEasy重组后,包装纯化具有感染性的腺病毒miRNA-140,通过荧光定量PCR检测,软骨肉瘤细胞中miRNA-140升高4.2±0.2倍.结论:成功构建了成熟miRNA-140的腺病毒表达载体.
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同源重组
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文献信息
篇名
miRNA-140过表达腺病毒载体的构建及鉴定
来源期刊
东南大学学报(医学版)
学科
生物学
关键词
miRNA-140
AdEasy系统
荧光定量PCR
骨肉瘤细胞
年,卷(期)
2016,(1)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
6-10
页数
5页
分类号
Q782
字数
3089字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1671-6264.2016.01.002
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
贺鹏
南方医科大学附属深圳恒生医院口腔科
4
5
2.0
2.0
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
二级参考文献
(0)
共引文献
(0)
参考文献
(0)
节点文献
引证文献
(0)
同被引文献
(0)
二级引证文献
(0)
2016(0)
参考文献(0)
二级参考文献(0)
引证文献(0)
二级引证文献(0)
研究主题发展历程
节点文献
miRNA-140
AdEasy系统
荧光定量PCR
骨肉瘤细胞
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
东南大学学报(医学版)
主办单位:
东南大学
出版周期:
双月刊
ISSN:
1671-6264
CN:
32-1647/R
开本:
大16开
出版地:
南京市丁家桥87号
邮发代号:
28-265
创刊时间:
1960
语种:
chi
出版文献量(篇)
4012
总下载数(次)
7
总被引数(次)
22144
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