雌二醇通过增加端粒酶活性影响人LECs生长动力学的实验研究

• 作者: 康刚劲 徐曼华 王杰 罗波 蒋燕 袁雪峰
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 关键词: 晶状体上皮细胞 雌二醇 端粒酶 年龄相关性,白内障 凋亡 增生 细胞培养 细胞系
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 219-225
• 页数: 7页
• 字数: 5768字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2016.03.006

摘要

背景 人LECs表达端粒酶活性,其活性改变与白内障的形成相关.研究证实,雌激素能增加入子宫内膜癌及乳腺癌细胞的端粒酶活性,从而发挥促进增生、抗凋亡作用,但能否增加入LECs中的端粒酶活性从而影响其生物学功能,国内外鲜见报道. 目的 探讨β型雌二醇(β-E2)是否能增加入LECs端粒酶活性及其对人LECs增生和凋亡的影响.方法 体外培养并传代人LECs细胞系,先用1×10-6 mol/Lβ-E2分别作用人LECs 0、6、12、24和48 h,采用RT-PCR法确定增加人LECs中端粒酶逆转录酶(hTERT) mRNA表达的最佳时间.将培养的人LECs细胞分为5个组,空白对照组细胞进行常规培养,溶剂对照组在培养液中添加体积分数0.1％乙醇,不同浓度β-E2组分别在培养液中添加1×10-8、1×10-7和1×10-6 mol/Lβ-E2,继续培养细胞24 h,采用RT-PCR法检测各组人LECs中hHERT mRNA的相对表达量;采用端粒重复序列扩增(TRAP)-ELISA法检测端粒酶活性;采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组细胞的增生值;采用Hoechst33258荧光染色法分析人LECs的凋亡情况. 结果 1×10-6 mol/L β-E2浓度下能够增加人LECs中hTERT mRNA相对表达量的最佳作用时间为24 h.1×10-8、1×10-7和1×10-6 mol/Lβ-E2组人LECs中hTERT mRNA的相对表达量分别为0.477±0.015、0.712±0.013和0.914±0.031,明显高于空白对照组的0.428±0.010及溶剂对照组的0.426±0.010,差异均有统计学意义(均P＜0.05).1×10-8、1×10-7和1×10-6 mol/L β-E2组端粒酶活性值分别为0.711±0.015、0.941±0.010和1.249±0.047,明显高于空白对照组的0.535±0.013和溶剂对照组的0.543±0.013,差异均有统计学意义(均P=0.000).1×10-8 mol/L β-E2组细胞的增生值(A值)明显高于1×10-7 mol/Lβ-E2组和1×10-6mol/L β-E2组,差异均有统计学意义(均P=0.000),而1×10-7 mol/L β-E2组和1×10-6mol/L β-E2组与空白对照组间细胞中的细胞增生值间差异均无统计学意义(P=0.718、0.856).1×10“、1×10-7和1×10-6mol/L β-E2组的细胞凋亡率均低于空白对照组和溶剂对照组(均P=0.000);空白对照组与溶剂对照组间比较差异无统计学意义(P=0.777).人LECs增生值与hTERT mRNA相对表达量及端粒酶活性值间无明显直线相关关系(r=-0.299,P=0.278;r =-0.157,P=0.576).人LECs凋亡率与hTERTmRNA相对表达量及端粒酶活性值间均呈明显负相关(r=-0.975,P=0.000;r=-0.981,P=0.000). 结论 β-E2能上调人LECs中的端粒酶活性,稍高浓度的β-E2可能通过增加人LECs的端粒酶活性而抑制细胞凋亡,但无促增生作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王杰	资阳市第一人民医院眼科	2	5	2.0	2.0
2	蒋燕	四川医科大学附属第一医院眼科	2	5	2.0	2.0
3	康刚劲	四川医科大学附属第一医院眼科	2	5	2.0	2.0
4	徐曼华	四川医科大学附属第一医院眼科	2	5	2.0	2.0
5	袁雪峰	资阳市第一人民医院耳鼻喉科	1	3	1.0	1.0
6	罗波	四川医科大学生物化学教研室	1	3	1.0	1.0