家蚕杆状病毒DNA聚合酶在Bac-to-Bac系统的表达及活性检测

• 作者: 周亚竟 楚茨 陈慧卿
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: DNA聚合酶 家蚕杆状病毒表达系统 重组蛋白 酶活性
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1049-1052
• 页数: 4页
• 分类号: Q939.4|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2016.06.015

摘要

DNA复制是杆状病毒生活史中最重要的事件,其中DNA聚合酶是病毒复制过程的关键酶.从家蚕杆状病毒(BmN-PV)基因组PCR扩增获得DNA聚合酶基因BmNPV-pol的序列,利用Bac-to-Bac系统构建重组杆状病毒vBmNPV-POL,并感染家蚕5龄幼虫,通过SDS-PAGE和Western blotting检测重组BmNPV-POL蛋白在蚕体内成功表达,经Ni-NTA柱纯化获得了纯度较高的重组BmNPV-POL蛋白.以poly(dA)/oligo(dT)为模板,比较在原核细胞和家蚕杆状病毒表达系统获得的重组Bm-NPV-POL蛋白的酶活性,结果表明在家蚕幼虫体内表达并纯化的重组BmNPV-POL的酶活性明显较高.利用家蚕杆状病毒表达系统简便、快速获得重组BmNPV-POL蛋白,有助于后续对BmNPV复制机制的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈慧卿		13	83	5.0	8.0
2	周亚竟		5	3	1.0	1.0
3	楚茨		1	0	0.0	0.0