荧光实时定量PCR检测溶藻弧菌方法的建立

• 作者: 林锦标 胡永狮 郭以河 钟渊福
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: qPCR 溶藻弧菌 快速鉴定
• 年，卷（期）: 2016,（21）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 3974-3977
• 分类号: R115
• 语种: 中文

摘要

目的 建立荧光实时定量PCR(qPCR)定量检测溶藻弧菌的方法,检测该方法的灵敏度并与传统细菌培养比较其特异性吻合率.方法 选择溶藻弧菌的鞭毛基因fliC为目的基因设计探针引物,建立Taqman探针qPCR体系.采用双盲法设计,分别用qPCR和Biolog Microstation System对溶藻弧菌和10株相关细菌进行鉴定,以考核qPCR检测体系的特异性.同时,通过梯度稀释和绘制标准曲线,评价利用qPCR检测溶藻弧菌的灵敏度.结果 本试验建立的qPCR方法能特异、准确、快速鉴定溶藻弧菌,敏感度达102 CFU/ml.结论 qPCR方法能够有效快速检测溶藻弧菌.