1,4-苯醌诱导HL60细胞自噬及活性氧在自噬发生中的作用

• 作者: 孙书强 张亚亚 朱华 杨新军 覃琼玉 闫洪涛
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 关键词: 苯 苯醌 自噬 活性氯组分
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 325-328
• 页数: 4页
• 字数: 3438字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2016.05.002

摘要

目的 研究1,4苯醌(1,4-BQ)能否诱导HL60细胞发生自噬以及活性氧(ROS)在自噬发生中的作用.方法 CCK8法检测不同浓度1,4-BQ对HL60细胞的毒性作用,并据此选择观察细胞自噬效应的适宜染毒浓度.将对数生长期细胞分为对照组、1,4-BQ染毒组(10 μmol/L 1,4-BQ染毒24 h)、N-乙酰半胱氨酸(NAC)组(5 mmol/L NAC处理24 h)和1,4-BQ+NAC干预组(5 mmol/L NAC干预1h后加10 μmol/L 1,4-BQ处理24 h).吖啶橙染色检测自噬酸性囊泡,免疫荧光染色法定性检测自噬蛋白LC3的表达定位,蛋白免疫印迹法定量检测LC3和Beclin1的蛋白表达.结果 HL60细胞活力随着1,4-BQ浓度增加而逐渐下降,呈剂量-反应关系,与对照组比较,20.0、40.0 μmol/L染毒组HL60细胞存活率明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,1,4-BQ染毒组自噬酸性囊泡增多;免疫荧光定性检测结果显示,膜型LC3II蛋白表达增加.蛋白免疫印迹结果显示,1,4-BQ染毒组LC3和Beclin1蛋白表达增加,分别比对照组增加了12.4％和27％,差异有统计学意义(P＜0.05).与1,4-BQ染毒组比较,1,4BQ+NAC干预组自噬酸性囊泡明显减少,LC3和Beclin1蛋白表达下降,分别比1,4-BQ组下降了12.6％和22.6％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 1,4-BQ可诱导HL60细胞发生自噬,其诱导的自噬至少部分来源于ROS途径,抗氧化剂可有效抑制自噬的发生.