中华蜜蜂信息素结合蛋白OBP10的基因克隆、原核表达和配基结合特性分析

• 作者: 吴帆 唐明珠 李红亮 谭静 黄君君
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 中华蜜蜂 信息素结合蛋白 信息素 荧光竞争 结合特性
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 25-32
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2016.01.004

摘要

[目的]气味结合蛋白在中华蜜蜂Apis cerana cerana嗅觉系统中起到重要作用,本实验拟研究中华蜜蜂一个新的信息素结合蛋白OBP10及其与蜜蜂信息素以及蜜源开花植物挥发物的结合特性.[方法]本实验通过RT-PCR扩增获得OBP10基因全长(GenBank登录号:KP717060.1),以pET-30a构建原核表达载体,并以Ni2+琼脂糖柱进行重组蛋白表达和分离纯化,在N-苯基-1-萘胺(N-phenyl-1-naphthylamine,1-NPN)作为荧光报告子下利用荧光光谱法体外研究重组AcerOBP10与多种候选化学配基的结合特征.[结果]经多序列联配分析,发现AcerOBP10的多个同源基因均为信息素结合蛋白(pheromone binding proteins,PBPs).配基结合特性分析显示,AcerOBP10对14种候选配基中的蜂王信息素成分对羟基苯甲酸甲酯(HOB)竞争力最大,相对荧光可降至6.06％,解离常数11.04μmol/L;进一步表明AcerOBP10属于一个新的中蜂PBPs.此外,AcerOBP10也能和包括工蜂信息素(香叶醇和橙花醇)、报警信息素(2-庚酮和乙酸异戊酯)等蜜蜂信息素以及蜜源开花植物挥发物之一的β-紫罗兰酮结合,表明AcerOBP1O可能是一种以信息素结合为主的多功能结合蛋白.[结论]AcerOBP10是中蜂一个新的信息素结合蛋白,与此前我们鉴定的蜂王信息素结合蛋白AcerASP1相比,AcerOBP10对蜜蜂信息素的结合谱更为广泛,这些结果将对进一步研究中华蜜蜂信息素识别和传递提供理论基础,对于深入了解中华蜜蜂嗅觉影响生理功能的行为机制具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李红亮	中国计量学院生命科学学院浙江省生物计量及检疫检验重点实验室	22	220	9.0	14.0
2	唐明珠	中国计量学院生命科学学院浙江省生物计量及检疫检验重点实验室	2	16	2.0	2.0
3	谭静	中国计量学院生命科学学院浙江省生物计量及检疫检验重点实验室	2	17	2.0	2.0
4	吴帆	中国计量学院生命科学学院浙江省生物计量及检疫检验重点实验室	3	29	3.0	3.0
5	黄君君	中国计量学院生命科学学院浙江省生物计量及检疫检验重点实验室	1	10	1.0	1.0