改良酶消化法在人脑胶质瘤细胞快速原代培养中的应用

• 作者: 严乐 刘亚伟 向伟 周强 易国仲 漆松涛 陈子阳 雷炳喜
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经胶质瘤 原代细胞培养 酶消化法
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 461-465
• 分类号: R73-351
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2016.06.06

摘要

目的 建立一种人脑胶质瘤细胞原代培养的改良酶消化法.方法 基于文献并结合实际工作中经验,改良既往文献报道的酶消化法,对32例不同级别的胶质瘤进行消化后行原代细胞培养,通过倒置相差显微镜观察肿瘤细胞的形态学特点,传代时采用差速贴壁法对原代细胞进行纯化.采用细胞免疫荧光法对原代细胞进行鉴定,通过细胞增殖实验(CCK-8法)绘制生长曲线,研究体外培养细胞的增殖情况.结果 采用改良的酶消化法成功培养28例,失败4例,成功率为87.5％.培养成功的细胞贴壁生长,细胞状态稳定,形态各异,生长状态良好,并可传代.细胞免疫荧光检测显示胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达阳性,证明培养的细胞为胶质瘤细胞;细胞增殖实验显示细胞在体外增殖活跃,肿瘤病理级别越高,细胞增殖能力越强.结论 改良的酶消化法用于人脑胶质瘤细胞原代培养具有简单、高效、成功率高等优点.