可编辑核酸酶介导的哺乳动物基因敲入技术最新进展

• 作者: 刘真 孙强 孙玲 张敏杰 杨宇丰 蔡毅君 陈文锋
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 基因敲入 锌指核酸酶 类转录因子效应物核酸酶 CRISPR/Cas9 哺乳动物
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 综述
• 页码范围: 72-80
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2016.01.0269

摘要

实验哺乳动物模型是研究基础生物学及人类疾病的重要工具,对实现转基因操作,尤其是基因敲入(knock-in,KI),具有重大意义.锌指核酸酶(zinc-finger nucleases,ZFN)、类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nucleases,TALEN)和RNA介导的、基于成簇的规律间隔的短回文重复序列和Cas9蛋白的DNA核酸内切酶[clustered regulatory interspaced short palindromic repeat (CRISPR)/Cas9-based RNA-guided DNA endonucleases,CRISPR/Cas9]等的出现,为科研工作者提供了革命性的转基因操作工具.这些可编辑核酸酶通过在靶标序列位置产生双链断裂缺口(double strand breaks,DSBs),并在同源修复模板存在的情况下发生同源重组,进而实现精确的基因敲入.该文主要综述了这些技术的原理及其在哺乳动物KI中取得的最新进展、提高KI效率以及降低脱靶效应的举措等,将有助于KI技术在未来转基因实践中的广泛应用.