利用CRISPR-Cas9系统定点突变猪MSTN基因的研究

• 作者: 刘娣 张冬杰 张旭 杨国伟 汪亮
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: CRISPR-Cas9系统 基因组编辑 突变率
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 207-212
• 页数: 6页
• 分类号: S828|S813.3
• 字数: 3442字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2016.01.028

摘要

为了今后能够有效的利用CRISPR-Cas9系统进行基因功能研究及转基因动物的培育,本研究将带有绿色荧光蛋白(GFP)和肌肉生长抑制素基因(Myostatin,MSTN)靶序列的CRISPR-Cas9系统转染入PK15细胞系,利用流式细胞仪分离并收集转染成功的阳性细胞,使用PCR扩增结合克隆测序的方法检测和分析CRISPR-Cas9系统的定点突变情况,以评价CRISPR-Cas9系统的作用效果.结果发现,随机挑选的100个阳性克隆中,38个发生了变异,突变效率为38％,其中32个为插入突变,6个为缺失突变.插入突变中突变1(Mutation1)所占比例最高,为47.4％.本研究中CRISPR-Cas9系统的突变效率达到了38％,是目前进行基因组编辑的一个有效工具,推测其突变类型具有一定的偏好性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘娣	黑龙江省农业科学院畜牧研究所	251	803	12.0	15.0
2	张旭	黑龙江省农业科学院畜牧研究所	148	261	7.0	10.0
3	张冬杰	黑龙江省农业科学院畜牧研究所	87	157	6.0	7.0
4	杨国伟	黑龙江省农业科学院畜牧研究所	54	254	8.0	14.0
5	汪亮	黑龙江省农业科学院畜牧研究所	52	117	6.0	7.0