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摘要:
采用RT-PCR和RACE技术从普通丝瓜果肉中分离到1条长达l 755 bp的cDNA序列,并对其进行序列分析.结果表明,该序列包含1个1 479 bp的开放读码框(ORF);预测编码492个氨基酸,理论分子量为56.98 kD,等电点为7.126;编码的蛋白与黄瓜(Cucumis sativus)、拟南芥(Arabidopsisthaliana)和萝卜(Raphanus sativus)同源蛋白的相似性均在92%以上,显示其高度的保守性,将基因命名为LcCA T1,GenBank登录号为:KP222260.Wolf Psort预测其亚细胞定位于过氧化物酶体(Peroxisomal)内;Motif Scan分析显示,蛋白氨基酸序列344~ 352位和54 ~ 70位分别为过氧化氢酶近端血红素—配体及血红素活性位点特征序列,推测其属于典型过氧化氢酶类(typical catalase,tCAT).荧光定量PCR分析显示,LcCAT1具有组织表达特异性,在普通丝瓜品种‘福丝3号’叶片中表达量最高,将近为花、果实、根和茎中表达量的5倍.LcCA T1在所选的6个丝瓜品种的果肉中呈差异表达,普通丝瓜中的表达量均高于有棱丝瓜;在普通丝瓜品种‘福丝3号’鲜切及采后储藏褐变过程中随时间增加而呈现上调表达趋势,且与其酶活性的变化趋势基本一致.LcCAT1可能在丝瓜果肉褐变产生过程中发挥着一定的调控作用.
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文献信息
篇名 丝瓜过氧化氢酶基因CAT1的克隆及表达分析
来源期刊 园艺学报 学科 农学
关键词 丝瓜 褐变 CAT1 基因克隆 实时荧光定量PCR
年,卷(期) 2016,(10) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 2039-2048
页数 分类号 S642.4
字数 语种 中文
DOI 10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0406
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园艺学报
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0513-353X
11-1924/S
大16开
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82-471
1962
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