NHERF4真核表达质粒的构建及其在Cac02细胞中的表达

• 作者: 张洋 徐丽红 杨奉天 王艳 胡慧 郑勇 龚先锋
• 来源期刊: 农垦医学
• 学科: 生物学
• 关键词: NHERF4 真核表达质粒 结肠癌 免疫荧光
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 基础与临床医学
• 页码范围: 102-106
• 页数: 5页
• 分类号: Q75
• 字数: 3800字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建人NHERF4真核表达质粒,转染人结肠癌Caco2细胞,建立能稳定携带NHERF4基因并高表达的Caco2细胞株,为后期相关实验奠定基础.方法:利用真核表达载体pIRES2-ZsGreen1构建人NHERF4 cDNA真核表达质粒,脂质体介导质粒pIRES2-ZsGreen1和NHERF4表达质粒pIRES2-ZsGreen 1-NHERF4转染人结肠癌细胞Caco2,荧光显微镜观察判断转染结果.G418筛选稳转细胞株,共聚焦免疫荧光观察NHERF4的亚细胞定位表达,蛋白免疫印迹实验观察NHERF4蛋白表达.结果:荧光显微镜观察证实质粒pIRES2-ZsGreen1和NHERF4表达质粒pIRES2-ZsGreen 1-NHERF4均成功转染Caco2细胞.蛋白免疫印迹实验证实转染pIRES2-ZsGreen 1-NHERF4质粒的Caco2细胞高表达NHERF4蛋白.结论:成功建立稳定表达外源NHERF4蛋白的pIRES2-ZsGreen 1-NHERF4Caco2细胞株,为能进一步分析研究NHERF4与MPR2在结肠癌多药耐药机制中的作用奠定了前期实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王艳	石河子大学医学院	58	192	8.0	12.0
2	徐丽红	石河子大学医学院	20	58	4.0	7.0
3	胡慧	石河子大学医学院	3	1	1.0	1.0
4	杨奉天	石河子大学医学院	6	3	1.0	1.0
5	龚先锋	石河子大学医学院	4	12	1.0	3.0
6	张洋	石河子大学医学院	4	12	1.0	3.0