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重组慢病毒LV5-NE的构建及NE促进NB4细胞增殖
重组慢病毒LV5-NE的构建及NE促进NB4细胞增殖
作者:
刘北忠
宋浩
李浏
杨蓉
蒋开玲
钟梁
阳小群
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
中性粒细胞弹性蛋白酶
慢病毒构建
增殖
凋亡
NB4细胞
摘要:
目的 构建重组慢病毒LV5-NE筛选纯NB4/LV5-NE细胞株,探讨中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)对人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4增殖的影响,为研究NE致白血病的可能机制奠定基础.方法 以质粒pCMV-myc-NE为模板得到PCR产物NE,将NE基因连接到穿梭载体pGLV10/U6/GFP/Puro后酶切验证,将序列正确的质粒与包装质粒pGag/Pol、pRey、pVSV-G共转染293T细胞.测定病毒滴度.实验分为空白组、LV5-NC组和LV5-NE组,病毒感染NB4细胞72 h后用嘌呤霉素筛选稳定表达的细胞.用Westemblot检测NE在NB4细胞中的蛋白表达以及其切割作用;CCK-8法观察NB4细胞增殖能力;流式细胞术测定NB4细胞周期和凋亡;Western blot检测pAkt和Akt以及Bax和Bcl-2蛋白表达.结果 成功构建表达NE的慢病毒LV5-NE,筛选得到纯NB4/LV5-NE细胞株,NE对NB4细胞的增殖有明显促进作用(P<0.05)结论NE在NB4细胞株中稳定表达后中可促进NB4细胞的增殖,其增殖作用可能通过激活PI3K/Akt通路调节.
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文献信息
篇名
重组慢病毒LV5-NE的构建及NE促进NB4细胞增殖
来源期刊
基础医学与临床
学科
医学
关键词
中性粒细胞弹性蛋白酶
慢病毒构建
增殖
凋亡
NB4细胞
年,卷(期)
2016,(1)
所属期刊栏目
研究论文
研究方向
页码范围
35-40
页数
6页
分类号
R392-33|Q279|Q255
字数
3011字
语种
中文
DOI
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中性粒细胞弹性蛋白酶
慢病毒构建
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凋亡
NB4细胞
研究起点
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期刊影响力
基础医学与临床
主办单位:
北京生理科学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1001-6325
CN:
11-2652/R
开本:
大16开
出版地:
北京东单三条5号
邮发代号:
82-358
创刊时间:
1981
语种:
chi
出版文献量(篇)
7613
总下载数(次)
10
总被引数(次)
29500
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