热诱导肿瘤特异性基因治疗载体的靶向性鉴定

• 作者: 周培华 姚建锋 孙学军 孙小菊 王孝珑 郑见宝 陈南征 魏光兵
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 热反应 hTERT启动子 自杀基因PNP 治疗载体 Western blot RT-PCR 细胞免疫荧光
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 9-13,38
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201601002

摘要

目的 检测已构建热反应元件修饰的端粒酶逆转录酶hTERT基因启动子(8HSEs-hTERTp)调控的基因表达载体肿瘤特异性和热诱导特性.方法 ①RT PCR、Western blot和免疫细胞化学检测细胞内hTERT mRNA和蛋白表达水平,选择hTERT高表达和低表达的细胞株作为该研究阳性细胞株和阴性细胞株;②收集前期已包装成功的热反应元件8HSEs和人端粒酶逆转录酶启动子hTERTp联合调控自杀基因PNP表达的慢病毒表达载体8HhP病毒液,感染hTERT+ SW480细胞及hTERT-MKN28细胞、hTERT-MRC-5细胞,细胞免疫荧光技术检测该治疗载体的肿瘤特异性及热反应特性;并用Western blot和RT-PCR分别检测热刺激条件下目的基因PNP在不同hTERT水平细胞株中的表达水平.结果 hTERT mRNA及蛋白在SW480细胞中高表达,在MKN28细胞和MRC-5细胞中低表达甚至阴性表达;免疫荧光、RT-PCR和Western blot结果显示,8HSEs-hTERTp调控的目的基因PNP只有在43℃处理下的SW480细胞中呈现高表达,而在阴性细胞株MKN28和MRC-5中PNP表达较少,而常温下SW480细胞中PNP的表达水平明显低于热处理组.结论 8HSEs修饰的hTERT启动子可以明显提高治疗载体的肿瘤特异性及热反应特性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑见宝	西安交通大学第一附属医院普通外科	48	185	7.0	10.0
2	魏光兵	西安交通大学第一附属医院普通外科	32	138	6.0	9.0
3	姚建锋	陕西省人民医院普外一科	17	51	5.0	7.0
4	孙小菊	西安交通大学第二附属医院手术室	6	26	2.0	5.0
5	周培华	西安交通大学第一附属医院普通外科	5	9	2.0	3.0
6	王孝珑	西安交通大学第一附属医院普通外科	5	5	1.0	2.0
7	陈南征	西安交通大学第一附属医院普通外科	17	5	2.0	2.0