Pin1抑制剂对小鼠植入前胚体外发育的影响

• 作者: 刘玥 宋婵婵 杜娟 王世鄂 程霄翔 贺琳 连秀丽 陈俊明
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Pin1 胡桃醌 2-细胞阻滞 实时定量聚合酶链反应 免疫荧光 小鼠
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 组织学胚胎学发育生物学
• 页码范围: 87-94
• 分类号: Q954.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.01.015

摘要

目的 观察Pin1在小鼠植入前胚中的定位分布及其抑制剂胡桃醌(Juglone)对小鼠植入前胚体外发育的影响.方法 免疫荧光染色观察不同发育阶段植入前胚中Pin1的分布;收集小鼠1-细胞胚,以KSOM培养液为对照组,以培养液中添加有不同浓度的Juglone为实验组,观察各组1-细胞胚体外发育情况;Real-time PCR检测体外发育2-细胞胚内干细胞转录因子(Sox2、Oct4 、c-Myc和Klf4)mRNA表达水平.结果 小鼠不同发育阶段植入前胚中都存在Pin1的表达,胞质和胞核内均有分布,且核内荧光着色明显比胞质强;10 μmol/L和25 μmol/L胡桃醌持续作用93h(注射人绒毛膜促性腺激素后27h ～ 120h)使1-细胞胚阻滞于2-细胞阶段,极少能过渡至4-细胞胚(P＜0.01).25μmol/L胡桃醌短时间作用18h(注射人绒毛膜促性腺激素后27～ 45h)同样使1-细胞胚发育阻滞于2-细胞胚(P ＜0.01);25μmol/L胡桃醌组2-细胞胚内Sox2 mRNA表达水平低于KSOM组(P＜0.05),而Klf4、c-Myc和Oct4 mRNA表达水平无明显变化(P＞0.05).结论 小鼠1-细胞胚之后,Pin1主要定位在细胞核内,提示其可能参与细胞转录活动.且Pin1抑制剂(胡桃醌)能使2-细胞胚至4-细胞胚过渡率明显降低,并使干细胞转录因子Sox2 mRNA表达下调,提示Pin1在小鼠植入前胚早期发育阶段具有一定作用,其参与调控合子基因组激活与干细胞转录因子Sox2有关.