A型肉毒毒素轻链多步纯化及其金属蛋白酶活性研究

• 作者: 卢晓雪 李涛 王慧 赵缓 黄彦杰
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: A型肉毒毒素 蛋白纯化 金属蛋白酶类
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 319-321
• 页数: 3页
• 分类号: R378.83|R996.1
• 字数: 3124字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2016.04.013

摘要

目的：利用基因工程方法原核表达N－His标签的A型肉毒毒素轻链（ BoNT－ALC）蛋白，多步纯化获得高纯度蛋白，并对其金属蛋白酶活性进行鉴定。方法以A型肉毒毒素为模板，构建重组表达载体pET22b－ALC，转化BL21（DE3），诱导蛋白表达，采用镍柱亲和纯化、阴离子交换以及分子筛纯化获取高纯度目的蛋白；通过体外切割特异性底物SNAP－25实验进行酶活性研究。结果与结论获得高纯度的BoNT－ALC蛋白，对金属蛋白酶活性进行了验证。该纯化方法获得的蛋白纯度高、均一性好，且具有很好的酶活性，为后续研究奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李涛	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	16	28	4.0	5.0
2	卢晓雪		1	0	0.0	0.0
6	赵缓	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	1	0	0.0	0.0
7	黄彦杰	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	1	0	0.0	0.0