间充质干细胞来源的Exosome对神经损伤的保护作用

• 作者: 关健 包新杰 吴昊 沈雅梅 薛春玲 陈云飞 韩钦 马百涛 魏俊吉
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 间充质干细胞 Exosome 神经损伤 治疗机制
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 33-36
• 页数: 4页
• 分类号: R642
• 语种: 中文
• DOI: 10.3881/j.issn.1000-503X.2016.01.006

摘要

目的 研究脂肪间充质干细胞(MSC)来源的Exosome对谷氨酸神经损伤的保护作用及可能机制.方法 采用透射电镜和Western blot法检测人脂肪MSC来源的Exosome的特征,ELISA法检测Exosome中主要的细胞因子.用PC12细胞建立谷氨酸神经细胞损伤模型,并分为对照组(未经谷氨酸损伤的细胞)、Glu组(谷氨酸损伤未经其他处理的细胞)、Glu+ Exo组(谷氨酸损伤后用100 ng/ml MSC Exosome处理的细胞)、Glu+Exo+ Akt组(谷氨酸损伤后用MSC Exosome同时加10 μmol/L Akt抑制剂LY294002处理的细胞)、Glu+ Exo+ Erk组(谷氨酸损伤后用MSC Exosome同时加10 μmol/L Erk抑制剂U0126处理的细胞)和Glu+ Exo+ TrkB组(谷氨酸损伤后用MSC Exosome同时加10 μmol/L TrkB抑制剂K252a处理的细胞),MTS法检测各组细胞的存活率并进行比较.结果 透射电镜下可见Exosome为40 ～ 100 nm的小囊泡结构,West-em blot法检测结果显示其可表达0D63、CD81、HSP70和HSP90等特征性蛋白.ELISA检测结果显示Exosome中主要包含的细胞因子为肝细胞生长因子和胰岛素样生长因子,含量分别为9336.49±258.63和58645.50±16014.62;而脑源性神经营养因子、血管内皮生长因子和神经生长因子含量均较低,分别为1928.25±385.47、1136.94±5.99和33.34±9.43.MTS检测结果显示,对照组、Glu组、Glu+ Exo组、Glu+ Exo+ Akt组、Glu+ Exo+ Erk组和Glu+ Exo+ TrkB组的PC12细胞存活率分别为0.842±0.047、0.306±0.024、0.566±0.026、0.461±0.016、0.497±0.003和0.515±0.034,其中,Glu组显著低于对照组(P=0.02),Glu+ Exo组显著高于Glu组(P=0.01),Glu+ Exo+ Akt组显著低于Glu+ Exo组(P=0.01).结论 人脂肪MSC来源的Exosome具有保护谷氨酸神经损伤的作用,这可能是通过激活磷脂酰基醇3激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶信号通路来实现的.