肠出血性大肠杆菌O157∶H7z1445基因缺失株的构建

• 作者: 刘坤 刘雪超 李涛 王慧 黄洁
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 肠出血性大肠杆菌O157∶H7 z1445基因 Red重组系统 缺失突变株
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 83-85
• 页数: 3页
• 分类号: Q784
• 字数: 1839字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2016.01.020

摘要

目的:利用Red重组系统敲除肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7的z1445基因,构建大肠杆菌z1445基因缺失突变株.方法:以O157∶H7为模板,PCR扩增目的基因两侧的同源臂序列,分别经酶切后连接到pUC19-kan质粒的卡那霉素抗性基因kan两侧,PCR获得中间嵌合kan基因(带有FRT位点)的同源线性片段,利用质粒pKD46敲除z1445基因,利用质粒pCP20去除抗性标记基因;PCR鉴定及测序验证目的基因缺失后,测定缺失株及野生株的生长曲线.结果:敲除了z1445基因,突变株与野生株的生长曲线接近.结论:构建了z1445基因缺陷型菌株,为进一步分析z1445基因在O157∶H7与宿主的相互作用中发挥的作用提供了材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王慧	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	48	107	5.0	8.0
2	李涛	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	16	28	4.0	5.0
3	刘坤	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	8	30	4.0	5.0
4	刘雪超	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	2	3	1.0	1.0
5	黄洁	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	1	1	1.0	1.0