人 Th17细胞体外诱导分化条件的研究

• 作者: 姚文兵 王宇恒 王欣 王辰 郁冬梅 郭薇
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人外周血单核细胞 Th17 细胞 体外 诱导分化
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 论 文
• 页码范围: 106-111
• 页数: 6页
• 分类号: R392|Q254
• 字数: 5127字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.2016010?

摘要

通过密度梯度离心法从人新鲜血液中分离获得人外周血单核细胞（PBMCs），比较分析加入不同细胞极化因子（IL-1β、IL-6、TGF-β和 IL-23）以及诱导不同时间（1，2，3，4 d）对 Th17细胞分化的影响，利用流式细胞仪、ELISA 方法以及Q-PCR 技术考察相关指标，评估人体外 Th17细胞的分化水平。研究表明，IL-1β、IL-6、TGF-β和 IL-23单独均能对 Th17细胞的分化起到促进作用，联用 IL-1β、IL-6、TGF-β和 IL-23时可使 Th17细胞体外分化效率达到最佳。随着诱导时间的延长， Th17细胞分化水平逐渐升高，培养3 d 时达到峰值，继续增加培养时间分化率反而出现降低。最终确立人 Th17细胞体外分化的最佳诱导条件：在加入 CD3抗体和 CD28抗体的基础上，同时加入 IL-1β、IL-6、TGF-β以及 IL-23共同培养人 PBMCs 3 d 可有效地刺激人 Th17细胞的分化，并且流式细胞检测 Th17细胞分化率达到近10％，ELISA 检测细胞上清液中 IL-17A含量达到近3 ng／mL，Q-PCR 方法分析 IL-17 mRNA 基因表达升高达15倍，此方案具有操作简便、周期短、成本低廉等优点，为 Th17细胞的功能研究及相关疾病治疗药物的研发建立了有效的检测平台。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚文兵	中国药科大学生命科学与技术学院	140	842	17.0	23.0
2	王欣	中国药科大学生命科学与技术学院	11	34	3.0	5.0
3	郭薇	中国药科大学生命科学与技术学院	9	9	2.0	3.0
4	王宇恒	中国药科大学生命科学与技术学院	8	4	1.0	2.0
5	王辰	中国药科大学生命科学与技术学院	6	4	1.0	2.0
6	郁冬梅	中国药科大学生命科学与技术学院	2	8	2.0	2.0