遗传性乳光牙本质家系致病基因突变的鉴定

• 作者: 刘彦山 张学 李闪 赵秀丽 高劲松 黄颖之
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 关键词: 乳光牙 DSPP基因 剪接点突变 微小基因
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 34-37
• 页数: 4页
• 字数: 3285字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9406.2016.01.009

摘要

目的 对一个遗传性乳光牙本质(dentinogenesis imperfecta shields typeⅡ,DGI-Ⅱ)家系进行DSPP基因的突变分析.方法 采集家系成员外周血或胎儿绒毛组织,用酚氯仿法提取基因组DNA.应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)-Sanger测序方法鉴定先证者DSPP基因第2～5外显子及外显子/内含子衔接区序列,并进行突变分析;针对突变位点设计错配引物引入AluⅠ酶切位点,通过限制性酶切和琼脂糖凝胶电泳方法在该家系正常人及60名无关正常个体中进行致病突变验证;构建含微型DSPP基因的pcDNA3.1基因表达载体,在体外培养细胞中验证突变致病性.结果 该家系3例患者和一名胎儿均携带DSPP基因内c.52-1G＞A的杂合突变,突变造成该基因第3外显子5 '端剪接点变异;60名对照者和家系正常个体均未携带该突变;微小基因(Minigene)体外表达显示c.52-1G＞A导致DSPP基因转录产物第3外显子的跳跃剪接.结论 本研究在一个DGI-Ⅱ家系中发现了DSPP基因内一个新的致病剪接突变(c.52-1G＞A),并在此基础上为先证者提供了产前基因诊断.