全氟异丁烯染毒对大鼠肺微血管内皮细胞的影响

• 作者: 丁日高 王和枚 王延琳 赵建 黄春倩
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺微血管内皮细胞 全氟异丁烯 细胞因子 黏附分子 基质金属蛋白酶
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 955-960
• 页数: 6页
• 分类号: R994.3|R996
• 字数: 3636字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2016.09.008

摘要

目的：观察体外培养的肺微血管内皮细胞（PMVEC）经全氟异丁烯（PFIB）染毒后其肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、细胞间黏附分子1（ICAM-1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）和MMP-9的含量变化。方法采用改进的组织块种植法分离培养大鼠PMVEC，细胞经鉴定后分为正常对照组和5个PFIB染毒组（n=3）。正常对照组为静息状态细胞；染毒组行PFIB暴露（浓度200 mg·m-3，持续5 min）染毒后0.5，1，2，4和8 h分别收集培养上清液和细胞裂解液。ELISA检测TNF-α，IL-1β，ICAM-1，MMP-2和MMP-9含量，明胶酶谱法分析MMP-2和MMP-9酶活性。结果①依据细胞生长的形态特征、特异性抗原的表达和植物凝集素结合实验鉴定，采用肺组织块原代培养法获得的细胞均符合PMVEC的特征。②与正常对照组比较，PMVEC经PFIB染毒后2 h细胞裂解液中TNF-α含量显著升高（P<0.05），4和8 h明显回落。细胞培养上清液中TNF-α含量变化趋势与细胞裂解液中TNF-α变化趋势类似，仅发生时间稍滞后。③PFIB染毒后PMVEC激活并合成IL-1β的时间稍滞后于TNF-α，但达峰与持续时间与TNF-α相似。④PFIB染毒后PMVEC培养上清液中ICAM-1含量持续保持于较低水平。⑤PFIB染毒组细胞裂解液中未检测到MMP-2活性，培养上清液中检测到较高水平的MMP-2含量与活性。PFIB染毒组的培养上清液和细胞裂解液中均未检测到MMP-9表达与活性。结论 PFIB染毒刺激存活的PMVEC合成并释放大量TNF-α，IL-1β，MMP-2和结合型ICAM-1。