UGT75B1、UGT71B6、UGT71C5酶活性及酶反应动力学分析

• 作者: 刘震 岑咏一 李旭锋 杨毅
• 来源期刊: 四川大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 高效液相色谱(HPLC) 拟南芥 尿苷二磷酸糖基转移酶(UGT) 糖基转移酶(GT)
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 生物学
• 页码范围: 169-174
• 页数: 6页
• 分类号: Q55
• 字数: 3894字
• 语种: 中文
• DOI: 103969/j.issn.0490-6756.2016.01.028

摘要

运用PCR扩增获得了属于尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶(UGT)家族UGT75B1、UGT71B6、UGT71C5的cDNA序列,构建了三种基因的GST融合表达载体,使用大肠杆菌对三种基因进行原核表达,从裂解液上清中获得具有活性的目的蛋白.分别以ABA、对氨基苯甲酸作为反应底物,通过高效液相色谱法,测定三种蛋白的酶活力.结果发现除了UGT75B1对对氨基苯甲酸表现出很高的活性以外,另外两种蛋白仅表现出了低水平的活性.三种蛋白对ABA都表现出了活性,UGT71B6具有最高的酶活力.对UGT75B1、UGT71B6、UGT71C5三种蛋白对ABA的作用进行了体外酶反应动力学分析,测定出它们的Km值分别为:0.73、0.43和0.45mM.以上结果说明UGT75B1对对氨基苯甲酸的活性明显高于ABA,对氨基苯甲酸是其专一底物.UGT71B6和UGT71C5对ABA都有较高的活性,两者Km值差距不大.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李旭锋	四川大学生命科学学院与生物资源与生态环境教育部重点实验室	68	338	10.0	13.0
2	刘震	四川大学生命科学学院与生物资源与生态环境教育部重点实验室	12	32	3.0	4.0
3	杨毅	四川大学生命科学学院与生物资源与生态环境教育部重点实验室	121	269	7.0	9.0
4	岑咏一	四川大学生命科学学院与生物资源与生态环境教育部重点实验室	1	5	1.0	1.0