半滑舌鳎黑色素聚集激素重组制备与生物活性分析

• 作者: 史宝 徐永江 朱学武 李斌 柳学周 王滨
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 半滑舌鳎 黑色素聚集激素 原核表达 生物活性
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 页码范围: 1595-1605
• 分类号: Q785|S917.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20151110173

摘要

根据半滑舌鳎黑色素聚集激素(MCH1)的cDNA序列设计特异性引物扩增成熟肽片段,利用原核表达载体pET-32a成功构建了重组MCH1/pET32a质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)后经IPTG诱导可产生N端含6个组氨酸的重组蛋白.半滑舌鳎MCH1重组蛋白大小为29.9 ku,32℃条件下以0.2 mmol/L IPTG诱导6h时目的蛋白表达量最高,占菌体总蛋白的49.8％.Western blotting免疫印迹表明,MCH1重组蛋白可被6×His抗体特异性识别.经Ni2+-NTA亲和柱纯化,可获得高纯度的MCH1重组蛋白.采用垂体离体孵育方法测试蛋白活性,MCH1重组蛋白可有效刺激或抑制垂体MCH和MSH肽的分泌,MCH肽水平先上升后下降,在100 nmol/L达到峰值,MSH肽水平显著升高.随着外源MCH1重组蛋白浓度的增加,垂体MCH1和MCH2 mRNA表达都呈现先上升后下降的趋势,POMC-a和PA CAP mRNA表达都呈现明显下降趋势,而POMC-b、MCHR1、MCHR2、MITF基本没有变化,表明获得的半滑舌鳎MCH1重组蛋白具有调节垂体激素分泌和基因表达的生理功能.本研究可为研制半滑舌鳎无眼侧黑化调控的专用生物制剂提供理论与技术依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	柳学周	中国水产科学研究院黄海水产研究所	30	744	16.0	27.0
3	徐永江	中国水产科学研究院黄海水产研究所	18	407	9.0	18.0
4	李斌	中国水产科学研究院黄海水产研究所	8	17	3.0	3.0
7	史宝	中国水产科学研究院黄海水产研究所	3	8	2.0	2.0
8	王滨	中国水产科学研究院黄海水产研究所	2	5	2.0	2.0
9	朱学武	中国水产科学研究院黄海水产研究所	2	5	2.0	2.0