题目：水稻低植酸基因 OsLpa1可变剪接和表达的时空特征及编码蛋白的亚细胞定位

• 来源期刊: 浙江大学学报（英文版）（B辑：生物医学和生物技术）
• 学科: 生物学
• 关键词: OsLpa1 低植酸 表达模式 可变剪接 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 页码范围: 100-109
• 页数: 10页
• 分类号: Q946.2
• 语种: 英文

摘要

目的：揭示水稻低植酸基因OsLpa1的分子生物学特征，特别是深化对其可变剪切和表达的时空和组织特征，以及蛋白亚细胞定位的认识。创新点：确定了 OsLpa1存在的三种剪切方式，明确了三种转录本在不同组织和发育时期丰度的变化；揭示了 OsLpa1表达的组织和时空差异，确定其在根、种子糊粉层细胞和花丝中高度表达；明确了三种转录本编码的蛋白均定位于亚叶绿体。<br>　　方法：通过培育OsLpa1启动子与β-葡萄糖醛酸糖苷酶（GUS）杂合基因的转基因植株，通过不同组织的GUS组织化学染色确定OsLpa1表达的组织特异性；通过设计特异性引物确定 OsLpa1存在的转录方式，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）分析三种转录本在不同组织和发育时期的丰度；采用 OsLpa1三种转录本与绿色荧光蛋白（GFP）基因构建杂合基因并在水稻原生质体中的瞬时表达，在共聚焦显微镜下观察蛋白的亚细胞定位。结论：OsLpa1在根、茎、叶和花丝有强烈的表达。它存在三种可变剪切方式，产生的三种转录本存在明显的时空和组织差异，但其编码的蛋白均定位于叶绿体。