α-胞衬蛋白siRNA对人涎腺导管细胞的影响

• 作者: 剧锦哲 庞春艳 王永福 王蓓
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: RNA, 小分子干扰 α-胞衬蛋白 人涎腺导管细胞 白细胞介素-10 干扰素-γ
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 论著?基础研究
• 页码范围: 880-882,887
• 页数: 4页
• 分类号: R373.9
• 字数: 2904字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2016.07.005

摘要

目的：观察α‐胞衬（α‐Fodrin）蛋白小干扰RNA（siRNA）对人涎腺导管（HSG）细胞的影响，探讨α‐Fodrin siRNA治疗干燥综合征（SS）的作用。方法实验分对照组、空载体组、α‐Fodrin siRNA1组及α‐Fodrin siRNA2组，将成功构建的10μg α‐Fodrin siRNA1和α‐Fodrin siRNA2表达载体分别采用脂质体法转染 HSG细胞，空载体组 HSG细胞转染等剂量的pGFP‐V‐RS空载体。转染后24、48、72和96 h观察细胞转染效率，实时荧光定量（RT ）‐PCR法检测4组HSG细胞中α‐Fodrin mRNA的表达水平；细胞荧光免疫法检测4组细胞中α‐Fodrin蛋白的表达水平；ELISA法检测4组细胞上清液中IFN‐γ、IL‐10的表达水平。结果转染后48 h HSG细胞转染效率最高；转染后48 hα‐Fodrin siRNA1组和α‐Fodrin siRNA2组 HSG细胞中α‐Fodrin mRNA和蛋白的表达水平明显低于对照组和空载体组（P＜0．05），且α‐Fodrin siRNA2组中α‐Fodrin mRNA的表达水平低于α‐Fodrin siRNA1组的表达水平（P＜0．05）；α‐Fodrin siRNA1组和α‐Fodrin siRNA2组细胞上清液中IL‐10的水平明显升高，较对照组和空载体组差异有统计学意义（P＜0．05），α‐Fodrin siRNA1组和α‐Fodrin siRNA2组比较差异无统计学意义（P＞0．05）；α‐Fodrin siRNA1组和α‐Fodrin siRNA2组细胞上清中 IFN‐γ的水平低于对照组和空载体组，但4组之间比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论 HSG细胞转染α‐Fodrin siRNA载体后，α‐Fodrin mRNA和蛋白的表达水平下降，同时细胞上清中IL‐10的水平升高、IFN‐γ水平下降，提示α‐Fodrin siRNA可以减轻炎性反应，为SS的治疗提供实验依据。