J亚群禽白血病病毒 SUJ及兔 IgGFc基因在腺病毒表达系统中的融合表达

• 作者: 侯继波 唐应华 梅梅 秦爱建 钱科
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: J亚群禽白血病病毒 gp85基因 兔IgGFc 腺病毒 融合表达
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医?水产养殖
• 页码范围: 848-853
• 页数: 6页
• 分类号: S858.35.3
• 字数: 4762字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2016.04.021

摘要

为获得J亚群禽白血病病毒（ ALV-J）囊膜蛋白gp85和兔IgGFc的融合蛋白，通过腺病毒表达系统融合表达ALV-J SUJ和兔IgGFc（ rIgGFc）基因。将pcDNA3.1-SUJ-rIgGFc用XhoⅠ、KpnⅠ进行双酶切，获得SUJ-rIgGFc基因，将其克隆至 pShuttle-CMV 质粒，构建穿梭载体 pShuttle-CMV-SUJ-rIgGFc，重组质粒转化含 pAdeasy-1的BJ5183-AD-1感受态细胞，获得重组腺病毒质粒 pAd-SUJ-rIgGFc，最后转染人293T细胞。表达的融合蛋白可被ALV-J单克隆抗体JE9以及羊抗兔IgG识别，重组蛋白的分子量大小约9.5×104，且与JE9及羊抗兔IgG都有很好的反应性；免疫共沉淀试验结果显示融合蛋白可与DF1细胞膜蛋白混合物反应并获得差异蛋白。该融合蛋白可与ALV-J宿主细胞蛋白发生特异性反应。