hsa-miR-34b过表达慢病毒载体的构建、转染和表达

• 作者: 周红光 邱雯莉
• 来源期刊: 兰州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: miR-34b 慢病毒载体 非小细胞肺癌
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 6-11
• 页数: 6页
• 分类号: R34
• 字数: 4527字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13885/j.issn.1000-2812.2016.03.002

摘要

目的 构建hsa-miR-34b过表达慢病毒载体以及空白阴性对照病毒载体,转染非小细胞肺癌A549细胞后观察不同组细胞内miR-34b的表达情况.方法 通过DNA重组将经过双酶切的慢病毒表达载体pHLV-U6-ZsGreen-Puro和hsa-miR-34b连接,获得重组慢病毒质粒pHLV-hsa-miR-34b.重组质粒经DNA测序后,转染293T细胞,包装慢病毒.用得到的慢病毒转染A549细胞,通过荧光显微镜观察转染状况,以及实时荧光定量PCR分析转染前后miR-34b的表达.结果 DNA测序结果显示,hsa-miR-34b基因片段已插入慢病毒载体中,A549细胞转染过表达慢病毒后miR-34b的表达升高.结论 pHLV-hsa-miR-34b慢病毒载体构建成功,并能明显增加A549细胞中miR-34b的表达量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周红光	南京中医药大学江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心	89	596	13.0	22.0
2	邱雯莉	南京中医药大学江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心	7	15	2.0	3.0