团头鲂NK-lysin基因鉴定和表达分析

• 作者: 丁祝进 刘红 崔蕾 王卫民 范君 詹柒凤
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 团头鲂 嗜水气单胞菌 抗菌肽 NK-lysin 荧光定量 原核表达
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 页码范围: 1145-1155
• 分类号: Q786|S917.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20160110237

摘要

为研究抗菌肽NK-LYSIN在团头鲂免疫系统中的可能功能,本实验从团头鲂转录组中钓取到2个NK-lysin基因(nkla和nklb),通过PCR扩增并测序验证其ORF序列.通过荧光定量PCR检测其在健康组织和嗜水气单胞菌感染后免疫组织中的表达,并构建其原核表达体系.结果显示,团头鲂nkla和nklb分别编码122和136个氨基酸,NKLA和NKLB均属于鞘脂激活蛋白样蛋白家族成员,各含有6个高度保守的半胱氨酸及1个SapB结构域.在健康团头鲂各组织中,nkla在脾脏中表达量极高,在肌肉和血液中表达量极低;而nklb则在肠中表达量较高,在头肾中表达量较低,在其他组织均有表达.nkla和nklb不同的表达模式暗示它们可能存在功能上的分化.经嗜水气单胞菌感染后,团头鲂nkla与nklb表达变化模式相似,头肾中,表达量在4h时显著下降;肝脏中,表达量在4h达到最高,而后回落到正常水平;在脾脏和肠中4h时开始下降,72 h时达到峰值,暗示NK-lysin可能在团头鲂抗嗜水气单胞菌感染过程中发挥重要作用.另外,本实验对nkla和nklb进行了原核表达,为进一步研究NK-lysin的功能奠定了基础.