玉米ZmMPK5酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活作用检测

• 作者: 王瑞云 蒋明义 马芳芳
• 来源期刊: 山西农业大学学报(自然科学版)
• 关键词: ZmMPK5 酵母双杂交 诱饵载体 MaV203 自激活
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 特约稿件
• 页码范围: 170-175
• 页数: 6页
• 分类号: S513|Q78
• 语种: 中文

摘要

玉米中ZmMPK5参与了ABA诱导的抗氧化防护从而增强了植物对干旱、盐渍以及氧化胁迫的忍受能力,然而截至目前对其潜在的分子机制却知之甚少.为构建玉米ZmMPK5酵母双杂交诱饵表达载体,并检测其在宿主酵母菌MaV203中的自激活活性和毒性,利用gateway技术,以实验室保存的重组质粒pMD19T-ZmMPK5为模板,扩增得到带有attB位点的ZmMPK5基因的ORF片段,通过BP重组反应和LR重组反应,最终将该片段构建到诱饵表达空载体pDEST32上,PCR及测序鉴定结果表明,成功构建了阅读框方向和序列均正确的重组诱饵载体pDEST32-ZmMPK5.用PEG/LiAc法将重组诱饵质粒pDEST32-ZmMPK5转化酵母菌株MaV203感受态细胞,通过缺陷型平板表型分析以及X-gal分析实验检测诱饵载体表达的蛋白对宿主细胞是否具有毒性和自激活作用.最终结果表明构建的诱饵载体对宿主酵母菌MaV203既无毒性也无自激活活性,可用于后续研究,为进一步利用酵母双杂交方法从玉米cDNA文库中筛选与ZmMPK5相互作用蛋白奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋明义	南京农业大学生命科学学院	20	263	8.0	16.0
2	王瑞云	山西农业大学农学院	23	249	8.0	15.0
3	马芳芳	山西农业大学农学院	4	76	3.0	4.0