沙拉沙星单克隆抗体制备及鉴定

• 作者: 刘儒彪 刘玺 刘璐 宋照军 张改平 王慧 王方雨 胡骁飞 邓瑞广
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 沙拉沙星 单克隆抗体 杂交瘤细胞 免疫学特性
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 页码范围: 87-91
• 页数: 5页
• 分类号: S859.84
• 字数: 3720字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2016.02.015

摘要

为制备敏感性好、亲和力高、特异性强的抗沙拉沙星（Sarafloxacin，SARA）单克隆抗体，采用碳二亚胺法合成SARA 人工抗原，通过免疫 BALB ／c 小鼠，选择血清效价高且敏感性好的小鼠，采用杂交瘤细胞技术进行细胞融合，筛选分泌抗 SARA 单克隆抗体（Monoclonal antibody，mAb）的杂交瘤细胞株；采用体内诱生腹水法制备 SARA mAb，通过间接 ELISA 和间接竞争 ELISA 对 SARA mAb 的免疫学特性进行鉴定。结果表明：小鼠经免疫原免疫后，小鼠多抗血清效价均达到1∶128000。选择敏感性较好的2号小鼠进行细胞融合，经多次亚克隆后，筛选出1 G3、3H3两株杂交瘤细胞株，其中1 G3所产 SARA mAb 效价较高，为1∶512000，IC50为6．34 ng ／mL，亲和常数为8．55×108 L ／mol，与诺氟沙星的交叉反应率为1．06％，与其他药物交叉反应率均低于0．50％。