果糖-1,6-二磷酸酶1过表达抑制他莫昔芬耐药的乳腺癌细胞迁移并促进细胞凋亡

• 作者: 刘一锋 季飞虎 张志乾 杨俊鸿 王念 苏敏 蒋玉林 钟昌莉 魏兰
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺肿瘤 果糖-二磷酸酶 细胞迁移分析 上皮-间质转化 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1075-1082
• 页数: 8页
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2016.11.391

摘要

目的:探讨过表达果糖-1,6-二磷酸酶1(fructose-1,6-bisphosphatase 1,FBP1)基因对他莫昔芬耐药性人乳腺癌MCF-7R细胞迁移和凋亡的影响.方法:首先采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测人乳腺癌亲本敏感细胞MCF-7和他莫昔芬耐药细胞MCF-7R中FBP1 mRNA和蛋白的表达水平.然后,采用脂质体转染法将FBP1过表达重组质粒转染至耐药细胞MCF-7R中,再应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测FBP1 mRNA和蛋白的表达水平,以验证FBP1基因过表达效果.接着,倒置光学显微镜下观察FBP1过表达后MCF-7R细胞的形态学变化;FCM法和细胞划痕愈合实验分别检测细胞凋亡及迁移能力的变化;蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax以及上皮-间质转化标志物E-cadherin和vimentin 的表达变化.结果:对他莫昔芬耐药的人乳腺癌细胞MCF-7R中FBP1 mRNA和蛋白的表达水平均比其亲本细胞MCF-7明显降低(P值均＜0.01).FBP1过表达重组质粒转染后,MCF-7R细胞中FBP1 mRNA及蛋白的表达水平均明显上调(P值均＜ 0.01),MCF-7R细胞形态由间质细胞样向上皮细胞样转变,细胞凋亡率明显升高(P＜0.01),迁移能力则明显降低(P＜0.01).FBP1过表达的MCF-7R细胞中Bcl-2和vimentin蛋白的表达水平明显下降(P值均＜ 0.01),Bax和E-cadherin蛋白的表达水平则明显升高(P值均＜ 0.01).结论:FBP1基因过表达可明显抑制人乳腺癌他莫昔芬耐药细胞MCF-7R的迁移和上皮-间质转化,并通过下调Bcl-2表达和上调Bax表达来促进肿瘤耐药细胞的凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏敏		8	16	2.0	4.0
2	王念		14	59	3.0	7.0
3	魏兰		6	12	2.0	3.0
4	钟昌莉		3	0	0.0	0.0
5	季飞虎		3	0	0.0	0.0
6	蒋玉林		4	0	0.0	0.0
7	刘一锋		3	0	0.0	0.0
8	张志乾		3	0	0.0	0.0
9	杨俊鸿		3	0	0.0	0.0