人P53的原核表达及包涵体复性研究

• 作者: 刘慧 张守涛 郭亚楠
• 来源期刊: 河南师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: p53 包涵体 透析复性 稀释复性 柱上复性
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 112-117
• 页数: 6页
• 分类号: Q816
• 语种: 中文
• DOI: 10.16366/j.cnki.1000-2367.2016.04.019

摘要

通过检测血清中p53蛋白及其抗体变化诊断肿瘤的ELISA试剂盒的研发需要大量制备p53蛋白.本研究通过构建人野生型p53基因的原核表达质粒pET-32a p53,在大肠杆菌中诱导表达得到p53包涵体蛋白,经包涵体变性、亲和纯化、复性得到可溶p53蛋白.发现利用8M尿素对包涵体进行变性溶解,经镍柱亲和纯化得到纯度超过95％的变性蛋白.尝试透析复性、稀释复性和柱上复性3种方法分别对p53变性蛋白进行复性.结果表明透析复性的复性率最高,这为原核表达制备p53提供了一种参考.本研究为ELISA法检测血清中p53蛋白及其抗体诊断肿瘤相关试剂盒研发奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张守涛		18	65	5.0	7.0
2	刘慧		69	191	7.0	10.0
3	郭亚楠		9	22	3.0	4.0