鲑鱼甲病毒 E1基因高保守区融合表达及免疫特性的分析

• 作者: 乔薪瑗 刘敏 唐丽杰 姜艳平 崔文 李一经 杜航 王丽 管雪婷 蒋烨
• 来源期刊: 淡水渔业
• 学科: 农学
• 关键词: 鲑鱼甲病毒(salmonid alphavirus, SAV) E1 高保守蛋白 原核表达 免疫特性
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 49-53
• 页数: 5页
• 分类号: S941.41
• 字数: 3749字
• 语种: 中文

摘要

根据 GenBank 中公布的鲑鱼甲病毒（salmonid alphavirus， SAV）SAV 1、 SAV 2和 SAV3三个基因型中 E1基因，选择高保守序列702 bp（436－1137）合成基因，命名为 SAV E1，将其克隆到原核表达载体 pCold TF 中构建重组质粒。然后将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞 BL21中，经终浓度为1．0 mmol／L 的 IPTG 诱导表达， SDS－PAGE 和 Western blot 鉴定，重组蛋白均获得了表达，表达 E1重组蛋白约95 kD。用镍离子亲和层析柱纯化重组蛋白，制备抗血清。间接 ELISA 结果显示，鼠抗重组蛋白 E1血清效价为1∶25600；间接免疫荧光结果显示，鼠抗重组 E1蛋白血清可与 SAV 发生特异反应，由此表明表达的 E1重组蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性，为 SAV 检测方法的建立提供理论依据。