植酸酶phyA基因的密码子优化及其在大豆中的表达

• 作者: 宋英今 寇莹莹 杨少辉 王洁华
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 大豆 phyA基因 密码子优化 遗传转化
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种?种质资源?分子遗传学
• 页码范围: 1798-1804
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2016.01798

摘要

植酸是植物源食品中的主要抗营养成分，降低植酸含量可有效提高大豆的营养利用率。本文根据大豆密码子使用偏好性，对无花果曲霉植酸酶 phyA 基因进行密码子优化，人工合成了适合在大豆中表达的 phyA(b)基因。以pCAMBIA3301为骨架，构建由大豆凝集素基因启动子和信号肽序列调控的植物表达载体pCBPS-phyA(b)。用农杆菌介导法遗传转化吉林35大豆子叶节。PCR检测表明目的基因已初步整合至大豆基因组中； bar试纸条表明所有阳性植株中均能检测到 bar 基因的蛋白产物；除草剂叶片涂抹显示野生型的叶片出现黄化或枯萎现象，而转基因植株叶片表现正常，具除草剂抗性；以半定量RT-PCR共筛选到13株转phyA和19株转phyA(b)阳性转基因大豆植株。通过对转基因大豆T3种子中植酸酶活性、无机磷和植酸磷含量等检测，证明人工基因phyA(b)比phyA在大豆种子中所表达的植酸酶具有更高的活性，说明密码子优化有利于提高外源基因的表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨少辉	天津大学环境科学与工程学院	23	474	8.0	21.0
2	王洁华	天津大学环境科学与工程学院	12	80	6.0	8.0
3	寇莹莹	天津大学环境科学与工程学院	2	4	1.0	2.0
4	宋英今	天津大学环境科学与工程学院	21	223	7.0	14.0