长链非编码RNA525893重组慢病毒载体的构建及其对宫颈癌细胞增殖的影响

• 作者: 丁祥亚 卢春 张咪 李婉 胡敏敏 贾雪梅
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 长链非编码RNA HeLa细胞 慢病毒载体 增殖
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 93-97
• 页数: 5页
• 分类号: R393|R737.33
• 字数: 3027字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13312/j.issn.1671-7783.y160007

摘要

目的:构建含长链非编码RNA525893(lnc525893)的重组慢病毒载体,观察其对宫颈癌细胞增殖的影响.方法:以人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)为模板扩增出lnc525893基因片段,并将其插入至慢病毒载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP中,构建重组质粒pCDH-lnc525893.将重组质粒pCDH-lnc525893、包装质粒psPAX2和包膜质粒pMD2.G共同转染人胚肾上皮细胞(293 T细胞),包装含有lnc525893的重组慢病毒,采用梯度稀释法测定病毒滴度.将重组慢病毒感染宫颈癌HeLa细胞,通过实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测HeLa细胞中1nc525893的表达;采用细胞增殖实验(cell counting kit-8,CCK-8)检测过表达lnc525893对HeLa细胞增殖的影响.结果:质粒双酶切鉴定以及核酸测序比对结果证实重组质粒pCDH-lnc525893构建成功.梯度稀释法测得重组慢病毒滴度约为1×107 pfu/mL.重组慢病毒感染HeLa细胞后,qRT-PCR结果显示细胞中lnc525893表达显著升高;CCK-8结果表明,高表达lnc525893可以抑制HeLa细胞的增殖.结论:成功构建含lnc525893的重组慢病毒载体,该长链非编码RNA能够抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢春	南京医科大学病原生物学系	92	236	7.0	9.0
2	李婉	南京医科大学病原生物学系	8	4	2.0	2.0
3	胡敏敏	南京医科大学病原生物学系	6	23	2.0	4.0
4	丁祥亚	南京医科大学病原生物学系	3	5	2.0	2.0
5	张咪	南京医科大学第四临床医学院妇产科	1	2	1.0	1.0