稳定表达NLRC5基因肝癌细胞株的建立

• 作者: 何莺华 倪明明 孟晓明 徐涛 李俊 李娟 黄成
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: NLRC5 肝癌 稳定细胞株 HepG2
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3072字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立起能够稳定表达 NLRC5 基因的肝癌HepG2细胞株. 方法 设计遗传霉素( G418 )的浓度梯度,通过对HepG2 细胞筛选最终确定筛选药物浓度. 将构建好的人源pEGFP-C2-NLRC5重组质粒利用脂质体介导法转染至HepG2肝癌细胞株中,用G418筛选出耐药阳性克隆. 通过免疫荧光技术观察绿色荧光蛋白稳定表达情况, Western blot法验证NLRC5蛋白表达情况. 结果 G418 在14 d内使HepG2细胞全部死亡的最小浓度是300 ng/ml. 用G418筛选瞬转pEGFP-C2-NLRC5 14 d在荧光显微镜下可见耐药克隆的形成. Western blot法检测显示,稳定过表达组 NL-RC5的蛋白水平比空质粒转染组高(t=15. 356,P<0. 05).结论 成功构建稳定表达NLRC5 基因的肝癌细胞株,为进一步研究NLRC5基因在肝癌的体内实验奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李俊	安徽医科大学药学院	493	5712	35.0	53.0
2	黄成	安徽医科大学药学院	52	485	12.0	20.0
3	徐涛	安徽医科大学药学院	24	51	4.0	5.0
4	孟晓明	安徽医科大学药学院	19	203	6.0	14.0
5	何莺华	安徽医科大学药学院	2	3	1.0	1.0
6	倪明明	安徽医科大学药学院	1	0	0.0	0.0
7	李娟		1	0	0.0	0.0