大豆酵母杂交cDNA文库的构建及GmSPX3互作蛋白的筛选

• 作者: 周汐 姚敏磊 张璟曜 杨守萍 盖钧镒 谢凤斌
• 来源期刊: 大豆科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 GmSPX3基因 Gateway技术 酵母杂交cDNA文库 酵母双杂交
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 18-24
• 分类号: S565.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2016.01.0018

摘要

为研究GmSPX3在大豆低磷胁迫响应中的作用机制,寻找与GmSPX3发生相互作用的蛋白质,利用Gateway 技术构建了低磷大豆根系酵母杂交cDNA文库,并使用pGBKT7-GmSPX3融合蛋白为诱饵,采用酵母双杂交方法筛选酵母杂交cDNA文库,经过显色反应验证后获得21个阳性克隆,通过生物信息学分析,选择2个转录因子编码基因GmUNE12和GmPosF21作为候选基因进行克隆,并分别构建AD载体pGADT7-GmUNE12和pGADT7-GmPosF21,与诱饵pGBKT7-GmSPX3进行一对一互作验证,结果证明GmUNE12和GmPosF21蛋白均与GmSPX3诱饵蛋白发生了相互作用.