二甲双胍抑制人食管鳞癌KYSE450细胞的增殖

• 作者: 丁显飞 刘凤云 吴少璇 周学良 李砺锋 池艳艳 王峰 豆萌萌 郭丽娜
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 食管肿瘤 二甲双胍 小鼠,裸 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1122-1129
• 页数: 8页
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2016.11.422

摘要

目的:探讨二甲双胍对人食管鳞癌KYSE450细胞增殖的抑制作用及可能的作用机制.方法:常规培养人食管癌KYSE450细胞,经不同浓度的二甲双胍(5、10、20和40 mmol/L)处理后,MTT法检测对KYSE450细胞的增殖抑制率,FCM法检测细胞的凋亡率;分别采用半定量RT-PCR法和蛋白质印迹法检测4E结合蛋白1 (4E-bingprotein 1,4EBP1)和S6激酶1(S6 kinase 1,S6K1) mRNA及蛋白的表达水平.构建食管鳞癌KYSE450细胞裸鼠皮下移植瘤模型,并于建模成功7d后分别予以连续腹腔注射二甲双胍或0.90％氯化钠溶液(对照组)15 d,每3d1次测量裸鼠移植瘤体积的大小;分别采用HE染色和免疫组织化学法检测,移植瘤组织中细胞学形态的改变及4EBP1和S6K1蛋白的表达水平.结果:不同浓度的二甲双胍(5、10、20和40 mmol/L)对KYSE450细胞的增殖抑制呈剂量、时间依赖性增强(P值均＜ 0.000 1);5、10和20mmol/L二甲双胍作用48 h后KYSE450细胞的凋亡率呈浓度依赖性增强(P均值＜ 0.05);随着浓度的增加或时间的延长二甲双胍组KYSE450细胞中4EBP1和S6K1 mRNA及蛋白的表达量均明显下降(P值均＜0.05).二甲双胍组裸鼠移植瘤的生长明显受到抑制(P＜0.000 1),且移植瘤组织中4EBP1和S6K1蛋白的表达量明显降低(P值均＜0.05).结论:二甲双胍可抑制人食管癌KYSE450的增殖,其机制可能与雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)下游通路中4EBP1和S6K1 mRNA和蛋白表达的下调有关.