重组蛋白sCAR-TMTP1增强腺病毒对骨肉瘤细胞基因转染效率的研究

• 作者: 祝文涛 程腾 罗丹枫 魏军成 魏睿 龚静吉
• 来源期刊: 骨科
• 关键词: 骨肉瘤 腺病毒 TMTP1肽 柯萨奇腺病毒受体 重组蛋白 基因治疗 肿瘤细胞
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究论著
• 页码范围: 442-447
• 页数: 6页
• 字数: 5439字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8573.2016.06.013

摘要

目的 提高腺病毒(adenovirus,ADV)在缺乏柯萨奇腺病毒受体(coxsackie and adenovirus receptor,CAR)的骨肉瘤细胞中的转染效率.方法 通过昆虫(Bac-to-Bac)杆状病毒表达系统表达含有CAR胞外段(sCAR)及TMTP1肽的重组蛋白(sCAR-TMTP1),并对其纯化、鉴定.流式细胞仪分别检测骨肉瘤细胞及人胚肾细胞293(HEK293)的CAR表达水平,ADV对其的感染效率及FITC-TMTP1的结合能力.重组蛋白sCAR-TMTP1与ADV共同孵育形成复合物,流式细胞仪研究其在缺乏CAR的骨肉瘤细胞(MG-63)中的转染效率.结果 表达及纯化的sCAR-TMTP1蛋白在相对分子质量约31000处可见特异蛋白条带,感染的sf9细胞裂解上清可与兔抗小鼠sCAR单克隆抗体发生特异性反应.MG-63可与FITC-TMTP1特异结合,其CAR表达水平低,ADV转染效率低.经sCAR-TMTP1修饰后的ADV/GFP对MG-63细胞的感染效率显著高于未经修饰的含报告基因GFP的ADV(ADV/GFP).结论 重组蛋白sCAR-TM-TP1可显著提升ADV对缺乏CAR的骨肉瘤细胞的转染效率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	祝文涛	华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科	21	66	5.0	7.0
2	罗丹枫	华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科	14	57	5.0	7.0
3	龚静吉	华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科	4	8	2.0	2.0
4	魏睿	华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科	8	23	2.0	4.0
5	魏军成	华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科	10	131	3.0	10.0
6	程腾	华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科	5	20	2.0	4.0