F1代转CuZnSOD基因猪的制备与研究

• 作者: 房国锋 曾勇庆 李川皓 王守栋 王延东 陈伟
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: CuZnSOD 磁性纳米颗粒 转基因猪 肉质 抗氧化性能
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 16-24
• 页数: 9页
• 分类号: S828|S813.3
• 字数: 5779字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2016.01.003

摘要

为进一步研究CuZnSOD基因对肉质表达调控的作用机理,探究通过磁性纳米颗粒介导精子载体法制备转基因猪的可行性.本试验在重组质粒先后与磁性纳米颗粒和精液共孵育的基础上,再通过人工授精获得F1代仔猪.对繁殖得到的F1代个体进行PCR、荧光定量PCR及Western blot检测,对屠宰的4头阳性猪采用绝对定量PCR进行转基因拷贝数鉴定,F1代个体达100 kg左右时抽样屠宰进行肉质及抗氧化性能测定.结果表明,F1代阳性率为30.23％.阳性组CuZnSOD在5种组织中的RNA和蛋白水平上的表达量较阴性组均上调.本试验得到的标准曲线:ACt=-3.121 6 lgN+17.281(R2=0.992 1,P＜0.001),4头阳性猪中外源基因拷贝数分别为25.89、80.61、106.69、83.03.肉质及抗氧化性能测定结果显示,阳性组肌肉滴水损失显著低于阴性组(P＜0.05);阳性组肌肉T-SOD1d、T-SOD2d活性显著高于阴性组,MDA1d、MDA2d含量显著低于阴性组(P＜0.05).研究结果表明:CuZnSOD基因的过表达可以提高肌肉的抗氧化性能,降低滴水损失,进而改善肉质,同时,证明磁性纳米颗粒介导的精子载体法可以用于制备转基因动物.