刚地弓形虫排泄-分泌抗原体外诱导的IFN-γ促CD4+CD25+调节性T细胞凋亡作用

• 作者: 仇晓艳 张璐彦 王丽娟 王勇 葛可 邱竞帆 陈慧
• 来源期刊: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 刚地弓形虫 排泄-分泌抗原 CD4+CD25+调节性T细胞 细胞凋亡 γ-干扰素
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 183-188
• 分类号: R382.5
• 语种: 中文

摘要

目的 研究刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)RH株和TgCtwh3株排泄-分泌抗原(ESA)体外诱导小鼠CD4+CD25+调节性T细胞凋亡和IFN-γ分泌方面的差异. 方法 分别制备刚地弓形虫RH株和TgCtwh3株的ESA.将分离的野生型C57BL/6小鼠脾单个核细胞随机分为3组(每孔2×106细胞),分别加入RH株ESA、TgCtwh3株ESA(均为10 μg/ml)和鸡卵清蛋白(OVA)进行诱导刺激,流式细胞术检测各组诱导刺激48 h和72 h的CD4 +CD25+调节性T细胞的早期凋亡情况,ELISA检测各组诱导刺激72 h细胞培养上清中的γ干扰素(IFN-γ)分泌水平.另外,将分离的野生型C57BL/6小鼠脾单个核细胞随机分为2大组(每孔 2×106细胞),其中—大组在分别加入两株ESA(10μg/ml)和OVA的同时加入抗IFN-γ中和抗体(10 μg/ml)进行诱导刺激72 h,流式细胞术检测各组CD4+CD25+调节性T细胞早期凋亡情况.用两虫株ESA (10μg/ml)及OVA分别诱导刺激IFN-γ基因敲除型和野生型C57BL/6小鼠的脾单个核细胞(每孔2×106细胞)72 h后,流式细胞术检测各组CD4+CD25+调节性T细胞早期凋亡情况. 结果 制备的刚地弓形虫RH株和TgCtwh3株ESA抗原蛋白浓度分别为0.54 mg/ml和2.14 mg/ml.流式细胞术检测结果显示,RH株和TgCtwh3株ESA组诱导刺激48 h后,CD4+CD25+调节性T细胞的早期凋亡率分别为(12.90±1.26)％和(9.71±1.04)％,均显著高于OVA对照组(4.48±0.48)％(P＜0.01);诱导刺激72 h后,RH株ESA组诱导CD4+CD25+调节性T细胞的凋亡率为(15.21±1.11)％,仍明显高于TgCtwh3株ESA组(11.02±0.92)％(P＜0.05)和OVA对照组(10.10±1.49)％(P＜0.01).ELISA检测结果显示,RH株和TgCtwh3株ESA组诱导刺激脾单个核细胞72 h的培养上清中分泌的IFN-γ水平分别为(4 764.0±118.7) pg/ml和(3 629.0±33.6) pg/ml(P＜0.01),均显著高于OVA对照组的(679.4±30.6) pg/ml (P＜0.01).流式细胞术检测结果显示,RH株ESA加抗IFN-γ中和抗体组诱导CD4+CD25+调节性T细胞的早期凋亡率为(10.44±1.44)％,明显低于未加抗IFN-γ中和抗体组(14.96±0.83)％(P＜0.05);但TgCtwh3株ESA加抗IFN-γ中和抗体与否诱导CD4+CD25+调节性T细胞的早期凋亡率变化不大(P＞0.05).RH株ESA诱导IFN-γ基因敲除小鼠的CD4+CD25+调节性T细胞凋亡率为(10.64±0.55)％,明显低于野生型小鼠的(15.21±1.11)％(P＜0.01);TgCtwh3株ESA诱导两组小鼠的CD4+CD25+调节性T细胞凋亡率的差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 刚地弓形虫RH株ESA在体外诱导CD4+CD25+调节性T细胞凋亡及促IFN-γ分泌强于TgCtwh3株ESA.弓形虫ESA诱导机体产生IFN-γ可通过介导调节性T细胞凋亡来促进弓形虫感染早期抗感染免疫力的形成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王勇	南京医科大学基础医学院病原生物学系	129	489	12.0	16.0
2	王丽娟	南京医科大学基础医学院病原生物学系	14	32	3.0	5.0
3	陈慧	南京医科大学第四临床医学院	19	95	5.0	9.0
4	张璐彦	南京医科大学第四临床医学院	3	2	1.0	1.0
5	邱竞帆	南京医科大学基础医学院病原生物学系	7	22	4.0	4.0
6	葛可	南京医科大学基础医学院病原生物学系	2	8	2.0	2.0