鸡Perilipin1基因的克隆及亚细胞定位

• 作者: 周纬男 李辉 王宇祥 王彦博 秦菲悦 程博涵
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡 脂滴包被蛋白 克隆 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1560-1568
• 分类号: S188
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2016.10.013

摘要

本研究旨在克隆鸡(Gallus gallus)脂滴包被蛋白基因(Perilipin1)的cDNA序列,并检测其在鸡前脂肪细胞分化过程中的亚细胞定位.本研究以7周龄肉鸡腹部脂肪组织为材料,采用RT-PCR和RACE的方法扩增并克隆了鸡Perilipin1基因的5'UTR、CDS和3'UTR片段,分析了该基因的结构;以鸡原代前脂肪细胞为材料,利用免疫荧光及激光共聚焦技术,在诱导分化的不同时间点(12～120 h),检测了鸡Perilipin1在前脂肪细胞中的表达位置.结果表明,本研究获得的鸡Perilipin11基因5'UTR、CDS和YUTR序列总长度为2 379 bp,该基因由9个外最子、8个内含子组成(ATG位于第二外显子上);在鸡原代前脂肪细胞诱导分化过程中,Perilipin1始终包被在脂滴周围.综上,本研究成功克隆了鸡Perilipinl基因的完整cDNA序列并确定了Perilipin1在鸡前脂肪细胞分化过程中与脂滴的空间位置关系,该结果为深入开展鸡Perilipinl基因的功能研究,揭示鸡脂肪代谢的分子遗传机理提供了重要的理论依据.