缺氧调控表达的 NT-3逆转录病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 刘勇 史利利 张军峰 张力 张建水 徐曦 杨蓬勃 祁存芳
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 逆转录病毒载体 缺氧调控表达 神经营养因子-3
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 190-194
• 页数: 5页
• 分类号: R338|R741.02
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201602009

摘要

目的：构建与鉴定含有5个拷贝缺氧反应元件(five copies of hypoxia responsive elements,5 HRE)的缺氧调控表达的神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)的逆转录病毒载体。方法用 PCR、酶切和连接等分子克隆技术将5 HRE 和人来源 NT-3片段克隆入逆转录病毒载体 pLNCX 中,构建重组逆转录病毒穿梭质粒 pLNCX-5 HRE-SV40-NT3-IRES-EGFP。经 PT67包装细胞包装、高速离心纯化和浓缩等方法,获得逆转录病毒 RV-5 HRE-NT3；用逆转录病毒感染 NIH 3T3细胞48 h 后,流式细胞仪检测并计算出病毒滴度。结果成功构建了重组逆转录病毒载体质粒pLNCX-5 HRE-SV40-NT3-IRES-EGFP,并获得相应的逆转录病毒 RV-5 HRE-NT3,经过高速离心纯化和浓缩后,其滴度可达9.1×106 cfu/mL。结论成功构建了缺氧调控表达的 NT-3逆转录病毒载体,为研究外源基因的缺氧调控特异性表达奠定了工作基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨蓬勃	西安交通大学医学部神经生物学研究所	37	249	6.0	15.0
2	刘勇	西安交通大学医学部神经生物学研究所	158	1055	16.0	22.0
3	张建水	西安交通大学医学部神经生物学研究所	18	69	5.0	8.0
4	张力	西安医学院人体解剖学教研室	20	30	2.0	5.0
5	张军峰	西安医学院人体解剖学教研室	22	40	3.0	5.0
6	祁存芳	青海大学医学院基础医学部解剖学教研室	9	42	3.0	6.0
7	史利利	西安医学院人体解剖学教研室	8	26	3.0	5.0