上调Cx43对心肌细胞间通讯及离子通道的影响

• 作者: 唐良虎 张彦 李德 杨大春 王强 马双陶
• 来源期刊: 西部医学
• 学科: 医学
• 关键词: 重组腺病毒转染 缝隙连接蛋白Cx43 细胞划痕荧光染料示踪 细胞间通讯 膜片钳
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 312-316,320
• 页数: 6页
• 分类号: R-33
• 字数: 4470字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3511.2016.03.005

摘要

目的 通过重组腺病毒介导缝隙连接蛋白Cx43在体外培养的心肌细胞中过度表达,观察心肌细胞间通讯及细胞离子通道变化.方法 通过RT-PCR法克隆SD大鼠缝隙连接蛋白Cx43基因的全长cDNA,用基因重组的方法构建腺病毒pAdEasy-1-Cx43.行心肌细胞基因转染后,分别用RT-PCR和蛋白质免疫印迹技术检测Cx43在心肌细胞中的mRNA和蛋白表达,用免疫荧光技术分析Cx43在心肌细胞膜上的分布.采用划痕标记荧光染料示踪(SLDT)技术观察培养心肌细胞群之间的罗氏黄(lucifer yellow,LY)染色传输,检测上调Cx43对心肌细胞间通讯的影响;采用单细胞膜片钳技术分析各离子通道电流的变化,观察上调Cx43对心肌细胞膜离子通道表达的影响.结果 腺病毒重组质粒pAdEasy-1-Cx43构建成功;转染心肌细胞后,pAdEasy-1-CX43转染组Cx43 mRNA及蛋白表达上调,且心肌细胞膜上分布较多;细胞划痕荧光染料示踪提示转染后,心肌细胞间通讯增强;膜片钳全细胞膜电流提示转染后钙内流降低,钾离子电流未发现有明显改变.结论 成功构建腺病毒重组质粒pAdEasy-1-Cx43载体,隙连接蛋白Cx43表达上调增强了心肌细胞间通讯以及钙内流,为Cx43改善心室肌电重构,减少或预防室性心律失常发生的进一步研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张彦	成都军区总医院心内科	133	506	10.0	18.0
2	李德	成都军区总医院心内科	33	114	6.0	7.0
3	杨大春	成都军区总医院心内科	43	213	8.0	11.0
4	王强	成都军区总医院心内科	18	44	4.0	5.0
5	马双陶	成都军区总医院心内科	22	100	7.0	8.0
6	唐良虎		1	2	1.0	1.0