半滑舌鳎Shh基因的克隆与表达及甲基化分析

• 作者: 张宁 温海深 董忠典 贾晓东 邵长伟 陈松林 齐茜
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 半滑舌鳎 Shh RACE qRT-PCR 性腺分化与发育 甲基化
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 316-327
• 页数: 12页
• 分类号: S96
• 字数: 6515字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2016.15229

摘要

通过RACE方法获得半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)Hh基因家族的Shh基因,该基因全长1922 bp,其中5′UTR 266 bp,3′UTR 360 bp, ORF1296 bp,编码431个氨基酸,经预测该多肽的相对分子质量为47.28 kD,理论等电点6.95,具有Hh基因家族特有的保守结构域。氨基酸序列分析表明,半滑舌鳎Shh与牙鲆的同源性最高,为82%,与其他鱼类同源性为74%~81%,与非洲爪蟾的同源性为61%,与人和鼠的同源性为63%~64%。甲基化结果显示, Shh基因在1龄卵巢中的甲基化程度普遍低于雄鱼与伪雄鱼精巢。基因表达分析显示, Shh基因在胚胎期的囊胚期表达显著高于其它时期(P<0.05),在雌雄成鱼8个组织器官均表达,在雌性性腺分化的关键期孵化后50 d,雌性性腺中表达量较前期升高,且显著高于同时期雄性性腺中的表达(P<0.05),在雄性性腺分化的关键期80~95 d, Shh基因在雄性中的表达水平显著升高(P<0.05),在8月龄、1龄及2龄雌鱼性腺中表达显著高于雄鱼与伪雄鱼。本研究表明,半滑舌鳎Shh基因在进化中高度保守,与胚胎分化、组织器官形成、雌雄性腺分化及性腺发育密切相关。