粘虫颗粒体病毒增效蛋白基因片段优化及功能

• 作者: 刘琴 徐健 徐贝贝 李传明 王建军 祁建杭 韩光杰
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 粘虫颗粒体病毒 增效蛋白 短截片段 增效活性
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1459-1467
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20150586

摘要

[目的]研究转宿主粘虫颗粒体病毒(Pseudaletia unipuncta granulovirus,PuGV-Ps)增效蛋白基因截短片段优化及其增效作用,探索增效蛋白基因的合理利用途径.[方法]生物信息学分析增效蛋白结构域,构建增效蛋白基因截短片段原核表达载体,分析目的基因片段表达产物的表达水平、围食膜蛋白降解效能和增强活性,进一步明确PuGV-Ps增效蛋白基因的功能区域.[结果]PuGV-Ps增效蛋白含有M60-1ike结构域、锌离子催化域和糖蛋白结合域,并包含13个潜在的糖基化位点.以此为依据设计P69(短截M60-like结构域)和P77(短截糖蛋白结合域)2个截短片段,构建了表达载体pET15b-P69和pET 15b-P77,原核表达量明显高于全长基因P104.表达产物纯化蛋白围食膜降解活性表明,P69对斜纹夜蛾围食膜大分子蛋白降解程度高于P77,但两者均低于P104.病毒增强苏云金杆菌(Bt)实验表明,截短片段的表达产物提高了Bt对小菜蛾的毒力,但增强活性显著低于P104.[结论]研究结果表明,PuGV-Ps增效蛋白基因N端M60-1ike结构域和C端糖蛋白结合域对其增效作用的发挥都具有一定功能,这些结构对维持增效蛋白的构象也发挥了一定的作用,截短片段P69有利于保持PuGV-Ps增效蛋白的活性、提高表达水平.该研究结果对增效蛋白的工业化生产具有一定的指导意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李传明		18	67	5.0	7.0
2	刘琴		51	253	9.0	12.0
3	王建军	扬州大学园艺与植物保护学院	81	584	13.0	22.0
4	韩光杰		14	30	3.0	4.0
6	祁建杭		24	114	7.0	9.0
7	徐贝贝	扬州大学园艺与植物保护学院	2	4	2.0	2.0