构建SD大鼠鱼藤酮中毒模型及其线粒体DNA突变的初步探索

• 作者: 凌瑶君 汲丽娟 逯军 邓勇
• 来源期刊: 中国热带医学
• 学科: 医学
• 关键词: 鱼藤酮 线粒体DNA 长PCR 全基因组测序 大片段缺失 突变
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 10-16
• 分类号: R363
• 语种: 中文
• DOI: 10.13604/j.cnki.46-1064/r.2016.01.03

摘要

目的 构建SD大鼠鱼藤酮慢性中毒模型,同时对SD大鼠组织标本(脑组织和肝脏)进行线粒体DNA突变的初步探索,为后续实验提供线索.方法 将75只雄性SD鼠随机分为三组,实验组:0.5 mg/(kg· d)鱼藤酮皮下注射4～8周,共45只;空白组:不予任何特殊处理4～8周,共15只;对照组:相同体积的二甲基亚砜(DMSO)皮下注射4～8周,共15只.其中实验组随机分为1、2、3小组,每小组15只;空白组和对照组也分别分为1、2、3小组,每小组5只.每组内相应的1、2、3小组分别在实验的第4、6、8周处死老鼠并留取相应的组织标本(中脑组织和肝脏),存储于-80℃冰箱中待用.在实验组的每个小组内分别随机选取3对组织标本,共9对;在空白组和对照组的每个小组内分别随机选取1对组织标本,共6对.随后进行组织DNA提取,采用2对引物进行长PCR并将PCR产物进行凝胶电泳分析,同时设计并利用线粒体DNA引物,用一代测序的方法进行线粒体全基因组测序.实验中观察各组大鼠的一般情况并进行行为学测试.结果 1)实验组大鼠在实验中表现出较为明显的中毒症状.在体重增长速度上与对照组和空白组存在明显差异(P＜0.05).在行为学上,实验组大鼠亦表现出了较为明显的行为学异常(P＜0.05).2)大鼠脑以及肝脏组织的长PCR凝胶电泳结果未发现明显的异常条带;所有测序突变(缺失、插入、点突变)均为大鼠固有突变.结论 0.5 mg/(kg·d)鱼藤酮皮下注射4～8周可导致SD大鼠鱼藤酮慢性中毒.SD幼鼠的选择、鱼藤酮剂量及作用时间、一代测序等多种因素可能是导致本次实验未检测到有意义的线粒体DNA突变的原因.因此,后续实验应做相应改进.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	逯军	中南大学湘雅医学院附属海口医院儿科	30	79	4.0	8.0
2	邓勇	中南大学湘雅医学院附属海口医院儿科	3	8	1.0	2.0
3	汲丽娟	中南大学湘雅医学院附属海口医院儿科	3	5	1.0	2.0
4	凌瑶君	中南大学湘雅医学院附属海口医院儿科	4	55	3.0	4.0