TGF-β1/CTGF信号转导通路在百草枯中毒致MRC5细胞损伤中的作用

• 作者: 刘贺荣 李宏辉 王亚鹏 蔡倩 黄敏
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 关键词: 百草枯 肺纤维化 转化生长因子 结缔组织生长因子 信号传递
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 484-488
• 页数: 5页
• 字数: 4663字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2016.07.002

摘要

目的 观察百草枯(PQ)染毒对人胚肺成纤维细胞(MRC-5)的影响,探讨PQ中毒致肺纤维化中转化生长因子β1(TGF-β1)/结缔组织生长因子(CTGF)信号转导通路的作用.方法 体外培养MRC-5细胞,用终浓度0、12.5、25.0、50.0、100.0、200.0、400.0 μmol/L PQ处理细胞24 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞存活率.用终浓度为0、25.0、50.0、100.0 μmol/L PQ染毒细胞24 h,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞TGF-β1蛋白表达水平.为了观察PQ染毒对TGF-β1/CTGF信号通路的影响,将MRC-5细胞分为正常对照组、25、50、100 μmol/L PQ染毒组、TGF-β1阳性对照组(50 μmol/L重组人TGF-β1;rhTGF-β1)、TGF-β1刺激组(100 μmol/L PQ+50 μmol/L TGF-β1),免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化Smad 2/3 (p-Smad 2/3)、CTGF蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测CTGF mRNA表达水平.结果 与对照组比较,MRC-5细胞存活率明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05),呈剂量-反应关系.ELISA显示,与对照组比较,25.0、50.0、100.0 μmol/LPQ染毒组TGF-β1蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);但诱导作用呈非剂量-反应关系.Western blot显示,与对照组比较,25.0、50.0、100.0 μmol/L PQ染毒组p-Smad2、p-Smad3蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);TGF-β1刺激组p-Smad2、p-Smad3蛋白量达到最多,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR显示,各剂量PQ染毒组CTGF mRNA表达明显升高,与对照组的差异有统计学意义(P＜0.05);共同刺激组的CTGF mRNA表达较正常对照组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,50.0、100.0 μmol/L PQ染毒组和TGF-β1刺激组的CTGF蛋白明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05),TGF-β1刺激组的CTGF蛋白表达量最高.结论 TGF-β1/Smad信号通路激活,调控下游靶基因CTGF介导TGF-β1的促纤维化效应,在PQ致肺纤维化中发挥重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡倩	宁夏医科大公共卫生学院实验中心	19	49	5.0	6.0